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豬流行性腹瀉抗原試劑盒 檢測(cè)方法

產(chǎn)品型號(hào):

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪問(wèn)量:946

更新時(shí)間:2024-06-24

簡(jiǎn)要描述:

豬流行性腹瀉(Porcine Epidemic Diarrhea, PED)病毒抗體檢測(cè)試劑盒用于檢測(cè)豬血清中的豬流行性腹瀉病毒抗體

詳細(xì)說(shuō)明:

96T/192T  1100/2200

 

豬流行性腹瀉抗體檢測(cè)試劑盒

 

 

1 抗原預(yù)包被板條 1/2 7 陰性對(duì)照 0.8/1.6ml

2 酶結(jié)合物 11/22ml 8 陽(yáng)性對(duì)照 0.8/1.6ml

3 10倍濃縮洗滌液 50/100ml 9 血清稀釋板 1/2

4 顯色液 11/22ml 10 封板膜 2/4

5 樣本稀釋液 50/100ml 11 說(shuō)明書 1

6 終止液 11ml      

 

豬流行性腹瀉(Porcine Epidemic Diarrhea, PED)病毒抗體檢測(cè)試劑盒用于檢測(cè)豬血清中的豬流行性腹瀉病毒抗體

 

需自備的設(shè)備及試劑

1.    微量移液器: 0.5μl-10μl10μl-100μl、100μl-1000μl

2.    一次性移液器吸頭。

3.    量筒:500ml。

4.    96孔板酶標(biāo)儀。

5.    蒸餾水或去離子水。

6.    洗瓶或洗板機(jī)。

 

樣品制備

取動(dòng)物全血,按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無(wú)溶血。

 

洗滌液的準(zhǔn)備

濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫,如有鹽結(jié)晶,搖動(dòng)使結(jié)晶的鹽溶解,然后用蒸餾水或去離子水作10倍稀釋。稀釋好的洗滌液可在4℃存放一周左右。

 

樣品的稀釋

在血清稀釋板中按199的體積比稀釋待檢血清(例如:495μl樣品稀釋液中加5μl待檢血清)。

注意:陰性和陽(yáng)性對(duì)照不用稀釋。取每個(gè)樣品后都要更換吸頭,準(zhǔn)確記錄每個(gè)樣品在板上的位置。每個(gè)樣品在加入到包被板微孔前應(yīng)充分混勻。

 

注意事項(xiàng)

1.    試劑盒使用前各試劑應(yīng)平衡至室溫,使用前應(yīng)搖勻,使用后放回2-8℃。

2.    不同品種、不同批號(hào)試劑盒的試劑組分不得混用,使用試劑時(shí)應(yīng)防止試劑污染。

3.    底物和終止液對(duì)皮膚和眼可能有刺激性,使用時(shí)應(yīng)該注意防護(hù)。

4.    TMB(底物B液)不要暴露于強(qiáng)光和避免接觸氧化劑。

5.    檢測(cè)板拆封后應(yīng)避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中,并盡快置于2-8)。

6.    所有廢棄物在丟棄之前應(yīng)合理處理以免污染。

7.    嚴(yán)格遵守操作說(shuō)明可以獲得*的結(jié)果。操作過(guò)程中移液、定時(shí)和洗滌等的全部過(guò)程必須準(zhǔn)確。

8.         血清稀釋板為一次性用品,不得重復(fù)使用;血清稀釋板的*容量為300μl/孔。

 

操作步驟

1.    取預(yù)包被的檢測(cè)板(根據(jù)樣品多少,可拆開分次使用),將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測(cè)板孔中。同時(shí)設(shè)陰性對(duì)照1孔、陽(yáng)性及對(duì)照2孔,取陰性及陽(yáng)性對(duì)照各100μl

分別加入反應(yīng)孔中。輕輕振勻孔中樣品(勿溢出)。

2.    蓋上封板膜(可按實(shí)際需要自行裁剪),置37℃溫育30分鐘。

3.    小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,使用工作濃度洗滌液每孔加250ul,后甩去孔內(nèi)液體,以上步驟重復(fù)4-6次,*在干凈吸水紙上拍干。

4.    每孔加酶結(jié)合物50μl,蓋上封板膜,置37℃溫育30分鐘。

5.    小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗滌4-6方法同3。切記*在干凈吸水紙上拍干。

6.    每孔加顯色液100μl,混勻、蓋上封板膜37℃閉光顯色10分鐘。

7.    每孔加終止液50μl,使反應(yīng)終止,10分鐘內(nèi)測(cè)定結(jié)果。

結(jié)果判定

用酶標(biāo)儀于450nm630nm作參比波長(zhǎng))讀取吸光度OD值。

試驗(yàn)成立的條件是:

陰性對(duì)照(NOD<0.15,同時(shí)陽(yáng)性對(duì)照(POD值>0.4。

計(jì)算方法:

樣品OD值÷陽(yáng)性對(duì)照OD均值=S/P

陰陽(yáng)性判斷:

S/P值≥0.35判斷為陽(yáng)性;

S/P<0.35判斷為陰性。

 



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