口蹄疫A型抗體快速檢測卡采用夾心法設計。將膠體金顆粒標記的純化口蹄疫病毒O型抗原1噴吐于結合墊上,干燥備用。而將純化的口蹄疫病毒O型抗原2和口蹄疫病毒O型抗體IgG調整至工作濃度,分別噴涂于NC膜的檢測帶(T)和質控帶(C)上。稀釋好的樣品血清從樣品墊流向金標成品膜。樣品中所含的抗體會在檢測帶的位置上與標記的抗原結合發(fā)生相應的反應。質控帶上發(fā)生的反應用以確定試紙條上液體正確的流向。
一、口蹄疫A型抗體快速檢測卡試驗方法:
1.撕開檢測卡鋁箔包裝袋,取出檢測卡,放于平整、潔凈的臺面上。
2.用配套吸管吸取已準備好的澄清樣本上清液,垂直而緩慢的滴加2-3滴(約60ul)到加樣孔內。(全血樣本須4滴以上)
3.室溫下放置10-20分鐘判斷結果,超過30分鐘的結果無效。
二、口蹄疫A型抗體快速檢測卡操作步驟:
取預包被的檢測板(根據樣品多少,可拆開分次使用),將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測板孔中。同時設陰性對照和陽性對照各2孔,取陰性及陽性對照各100μl分別加入反應孔中輕輕振勻孔中樣品(勿溢出)。
蓋上封板膜(可按實際需要自行裁剪),置37℃溫育30分鐘。
小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,使用工作濃度洗滌液每孔加250ul,后甩去孔內液體,以上步驟重復4-6次,后在干凈吸水紙上拍干。
每孔加酶結合物100μl,蓋上封板膜,置37℃溫育30分鐘。
小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗滌4-6次, 方法同3。切記后在干凈吸水紙上拍干。
每孔加顯色液100?l,輕微震蕩混勻、蓋上封板膜37℃閉光顯色10分鐘。
每孔加終止液50μl,使反應終止,10分鐘內測定結果。
三、口蹄疫A型抗體快速檢測卡結果判斷:
1.陰性:在觀察孔內,只有對照線區(qū)(C)出現一條紫紅色線。
2.陽性:在觀察孔內,檢測線區(qū)(T)及對照線區(qū)(C)同時出現紫紅色線。